Evaluación de una Vacuna Inactivada Oleosa del Virus de la Encefalitis Equina del Esteen Cobayos (Cavia porcellus) / Evaluation of an Oil Inactivated Vaccine of Eastern Equine Encephalitis Virus in Guinea Pigs (Cavia porcellus)

Se evaluó la inmunogenicidad y seguridad de una vacuna oleosa contra el virus de la encefalitis equina del Este, inactivada con etilenimina binaria, en tres formulaciones: Formulación I (F1): antígeno-fase oleosa; Formulación II (F2): antígeno-fase oleosa-medio de mantenimiento; Formulación III (F3): antígeno-fase oleosa-antígeno. Se evaluó la inmunidad durante un año (21, 30, 90, 160, 250, 305 y 365 d), utilizándose 70 cobayos (Cavia porcellus) de 3 a 4 meses de edad y 250 a 300 g de peso vivo, distribuidos al azar en 7 grupos de 10, para un total de siete tratamientos, a saber: Tratamiento 1 (T1): vacunados con una dosis de F1; Tratamiento 2 (T2): vacunados con dos dosis de F1; Tratamiento 3 (T3): vacunados con una dosis de F2; Tratamiento 4 (T4): vacunados con dos dosis de F2; Tratamiento 5 (T5): vacunados con una dosis de F3; Tratamiento 6 (T6): vacunados con dos dosis de F3; Tratamiento 7 (T7): no vacunados. Los cobayos se desafiaron a los 355 d post-vacunación vía intraperitoneal. Se detectó títulos de anticuerpos por inhibición de la hemoaglutinación (IH) ≥20 y por seroneutralización (SN) ≥40, a los 21 d post-vacunación cuando se usó una dosis. El ascenso máximo de anticuerpos por IH se observó a los 90 d, persistiendo e incrementándose en el desafío con una y dos dosis, a los 365 d post- vacunación. Formulaciones con dos dosis tuvieron mayores títulos en todos los períodos, siendo la F3 la que presentó los mayores títulos, seguida de la F2 y la F1, respectivamente (P<0,01). Los títulos de anticuerpos aumentaron después del desafío, siendo mayores en tratamientos con dos dosis (P<0,01). Los cobayos vacunados no desarrollaron enfermedad neurológica o viremia después del desafío. Se concluye que las formulaciones con una y dos dosis indujeron una respuesta de anticuerpos satisfactoria en cobayos durante un año.

The immunogenicity and safety of an oil vaccine against the eastern equine encephalitis virus, inactivated with binary ethylenimine in three formulations was evaluated: Formulation I (F1): antigen- oil phase; Formulation II (F2): antigen- oil phase-maintenance medium; and Formulation III (F3): antigen- oil phase-antigen. Seventy guinea pigs (Cavia porcellus) 3 to 4 months of age and 250 to 300 g of live weight were used to assess immunity for a year (21, 30, 90, 160, 250, 305 and 365 days). Animals were distributed at random in 7 groups of 10, for a total of seven treatments, as follows: Treatment: 1: vaccinated with one dose of F1; Treatment 2: vaccinated with two doses of F1; Treatment 3: vaccinated with one dose of F2; Treatment 4: vaccinated with two doses of F2; Treatment 5: vaccinated with one dose of F3; Treatment 6: vaccinated with two doses of F3; and Treatment 7: not vaccinated. The guinea pigs were challenged 355 days postvaccination through theintraperitoneal route. Antibodies titers were detected by hemoagglutination inhibition (HI) ≥ 20 and serum neutralization (SN) ≥40 to 21 days postvaccination with one dose. The maximum rise of antibodies with the HI was observed at 90 days, which persisted and increased in the challenge with one and two doses, 365 d postvacccination. Formulations with two doses showed the highest titers in all periods, being F3 the one which higher titles, followed by F2 and F1, respectively (P<0.01). Antibody titers increased after challenge, beinf higher with two doses. (P<0.01). Vaccinated guinea pigs did not develop neurologic disease or viremia after challenge. It is concluded that formulations with one and two doses, induced a satisfactory antibody response in guinea pigs for one year.

Desarrollo de una Vacuna Inactivada Oleosa con Cepa Venezolana del Virus de la Encefalitis Equina del Este / Oil Inactivated Vaccine Development with Venezuelan Strain of Eastern Equine Encephalitis Virus

Se utilizó la cepa El Pao de encefalitis del este venezolana, aislada en el 2002 (EE VE02 EL PAO) como antígeno, para producir una vacuna inactivada oleosa contra el Virus de la Encefalitis Equina del Este (VEEE) en tres formulaciones, a saber: formulación I (F1): antígeno-fase oleosa; formulación II (F2): antígeno-fase oleosa-medio de mantenimiento y formulación III (F3): antígeno-fase oleosa-antígeno. La suspensión de virus se obtuvo en monocapa de cultivo de células de riñón del mono verde africano. Como inactivante se usó la etilenimina binaria (BEI) con adyuvante incompleto de Freund. Se realizaron pruebas de identidad, carga viral, esterilidad, fisicoquímica, inocuidad, potencia, inmunidad y viabilidad. Todas estas pruebas de control de calidad fueron satisfactorias. Cuando las formulaciones se administraron a cobayos, estimularon títulos de anticuerpos por inhibición de la hemoaglutinación ≥ 20 y de seroneutralización ≥ 40, a los 21 d postvacunación con 1 dosis de 1 mL por vía subcutánea. No se observaron diferencias estadísticamente significativas (P>0,05) en la detección de anticuerpos entre las formulaciones a los 21 días posvacunación, aunque la F3 presentó mayores títulos, seguida de la F2 y la F1, respectivamente (P<0,01). Los anticuerpos neutralizaron in vitro las cepas virulentas del VEEE, y los cobayos vacunados no desarrollaron viremia ni enfermedad neurológica con el desafío de virus vivo, tanto por vía intracerebral como por vía intraperitoneal, en las pruebas de potencia. Se concluye que la vacuna es segura y provee una excelente protección contra la infección del VEEE.

The Pao of eastern encephalitis venezuelan isolated in 2002 (EE VE02 EL PAO) strain was used as an antigen to produce an inactivated oil vaccine against the Eastern Equine Encephalitis Virus (EEEV) in three formulations, as follows: Formulation I (F1): antigen in oil phase; Formulation II (F2): antigen in oil phase-maintenance medium; and Formulation III (F3): antigen-oil phase-antigen. The virus suspension was obtained from African green monkey kidney monolayer cell cultures. The binary ethylenimine (BEI) was used to inactivate the virus, along with an incomplete Freund´s adjuvant. The following quality control tests were performed: identity, viral load, sterility, physicochemical, safety, potency, immunity, and viability. All these tests were satisfactory. The administration to guinea pigs of a single subcutaneous dose of 1 mL of the formulations, caused stimulated antibody titers by hemagglutination inhibition (≥ 20) and serum neutralization (≥ 40), respectively, at 21 days post-vaccination. No statistically significant differences (P> 0.05) in the detection of antibodies between formulations at 21 days post-vaccination were observed, although F3 had higher titles, followed by F2 and F1, respectively (P<0.01). The antibodies neutralized EEEV virulent strains in vitro and the vaccinated guinea pigs did not develop viremia or neurological disease, when challenged with live virus, both intracerebrally and intraperitoneally in potency tests. It is concluded that the vaccine is safe and provides excellent protection against EEEV infection.

Pathology of the testicle after long-termanabolic steroid treatment in a thoroughbread horse from Venezuela

The aim of this study was to describe a case of pathology of the testicle after long-term anabolic steroid treatment in a Thoroughbread horse. Were study an equine Thoroughbread with cryptorchidism from Venezuela, male of 5 years old. With history of lameness chronic and subfertility. Necropsy was performed and samples of testicle tissue were collected. The tissue samples were fixed in formalin and processed by conventional H&E techniques. Additionally, the special staining procedure of Tricromico de Gomory and Blue VonKossa were also carried out. Samples of blood and urine were recollected for toxicological by competitive ELISA. The left testicle was diameter testicle 6cm. and cryptorchidism (testicle right). Macroscopic were observed bilateral fibrosis parenchyma testicle and atrophic. The histological study revealed atrophy of seminiferous tubules and interstitial fibrosis increases in collagen fibres in the lamina propria of seminiferous tubules and testicular interstitium. Lamina propria surrounding atrophic tubules was thickened by an increase in collagen type IV and elastic fibres and by proliferation of bizarre myoid cells. Basal lamina was also thickened but had decreased for collagen type IV. Special stain Tricromico of Gomory (+) showed fibrosis interstitium severed and VonKossa (-) no evidence mineral. Toxicological studies allowed the detection of boldenona and dexamethasone generic in blood and urine samples. To conclude, we detected the presence of pathology of the testicle associated a after long-term anabolic steroid treatment in a Thoroughbred horse.

Caracterización del Virus de la Encefalitis Equina del Este Mediante la Transcriptasa Reversa Reacción en Cadena de la Polimera y el Análisis del Polimorfismo de la Conformación de Cadenas Sencillas / Characterization of Eastern Equine Encephalitis Virus by Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction and Analysis of Single

El análisis de polimorfismo en la conformación de cadenas sencillas (SSCP, por sus siglas en inglés) se utilizó para caracterizar regiones del genoma de tres cepas de virus de encefalitis equina del este (VEEE), aisladas de cerebros de equinos muertos. Los segmentos de ARN fueron amplificados mediante la transcriptasa reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). Se analizó un fragmento de 542 pb de la región 3’no traducible del ARNm 26S y un fragmento de 532 pb del gen de la proteína no estructural P4 (nsP4), encontrándose que la migración de las cadenas sencillas de estos fragmentos de ADNc fueron diferentes en estos aislados virales, lo que indica que presentan polimorfismo genético en estas regiones del genoma, el cual es característico de cepas de VEEE, variantes Sur Americanas.

The single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis was developed to characterize RNA segments of the genome in three strains of virus eastern equine encephalitis (EEEV), isolated from dead equine brains. The RNA segments were amplified by the reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The analyses of the 542 pb fragment from the 3’ untranslated region of the 26S mRNA and the 532 pb fragment of the nonstructural P4 protein (nsP4) gene were performed. The results of the present investigation show that the migration of the single strands of the c-DNA fragments was different in these isolated viruses, which indicate genetic polymorphism in these genome regions, which is characteristic of EEEV strains from South American varieties.

Iatrogenic equine metabolic syndrome in thoroughbred horses

Equine metabolic syndrome (EMS) is a cluster of problem that includes obesity, insulin resistance and laminitis. In EMS peripheral adipocytes synthesize adipokines which are analogous to cortisol, resulting in Cushing syndrome like-signs and insulin resistance. The used of dexamethasone and triancinolone is very common and not permitted. Hypothesis or Objectives: The objective of this study was to describe metabolic syndrome iatrogenic in Thoroughbred horses. Were studied 22 Thoroughbred horses (12 female and 10 male), between 2-5 years old, in the national race Track “La Rinconada” Caracas-Venezuela. All equine were euthanized and study by necropsy. Samples were collected from the adrenal glands, gastric mucosa, pancreas, kidneys, liver, spleen, lungs, heart and adenohypofisys. Tissue sections were prepared and stained with Hematoxilin & Eosin (H&E) for light microscopy. Results: Clinical signs were polyury, polydipsy and secondary diabetes mellitus, recurrent infection, lethargie, laminitis and weight loss syndrome. Were isolates of recurrent infection: Salmonella sp., E. coli, Streptococcus sp, Staphylococcus, Enterococcus faecalis and Enterobacter cloacae. Necropsy revealed: weight loss, loss fatty subcutaneous, xantomathosis of subcutaneous tissue. Abscess in coxal tuberous, facial and shoulder region. Liver was swollen, friable and icteric. Renal cortical and papillary necrosis. Equine gastric ulcer syndrome severed. Liver with periacinar necrosis with a prominent acinar pattern and fatty degeneration severed. Necrosis and vacuolar (glycogen) degeneration islets of langerhans, fibrosis and chronic. Renal cortical and medullary necrosis, acute tubular necrosis and glycogen nephrosis, glomerulonephritis membranous. Hemorrhages in adrenal cortex and atrophy cortical. Conclusions: These results suggest a iatrogenic EMS in Thoroughbred associated with overdose and chronic dexamethasone and triancinolona

Obstrucción estrangulante del intestino grueso en equinos: evaluación clínica y tratamiento quirúrgico en dos casos / Strangulation obstructions of large intestine in horses: clinical evaluation and surgical treatment in two cases

La obstrucción estrangulante es la combinación de obstrucción simple del tracto gastrointestinal del equino acompañado de bloqueo del abastecimiento circulatorio, lo cual causa severa enfermedad intestinal. Esta afección es comúnmente conocida como Síndrome Abdominal Agudo o Cólico. La incidencia de esta afección es considerada baja con una mortalidad alta dependiendo del segmento anatómico involucrado y del tiempo con que se intervenga quirúrgicamente el paciente. En el presente trabajo se reportan los hallazgos clínicos e histopatológicos, el tratamiento quirúrgico, la evolución clínica y el manejo medico post-quirúrgico de dos casos de obstrucciones estrangulantes del colon mayor en equinos referidos a la Clínica Veterinaria Dr. “Luis Medina”. La historia, sintomatología clínica y pruebas de laboratorio orientaron el diagnóstico, el cual fue confirmado a través de laparotomía exploratoria, la resolución de cada caso fue acompañada con un estudio histológico del segmento intestinal afectado. La resolución en el caso número uno fue por enterotomía de vaciado, mientras que el caso dos fue tratado con reseción del colon mayor con entero anastomosis latero-lateral. Ambos casos sobrevivieron, observándose mejor progreso clínico post-quirúrgico en el caso número dos.

Strangulation obstructions are external vascular constriction with simultaneous blockage of intestinal lumen. It has also been referred cause severe intestinal disease in the horses and commonly related colic. The incidence of this lesion is low with high fatality influenced by anatomic segment involved and rapid surgical intervention at the horse. This paper report the history, clinical signs, histopathologic findings, surgical ma- nagement, clinical progress and post-surgical treatment in two case of strangulation of the large colon in horses sent to the veterinary clinic “Dr. Luis Medina”. History, physical examination, laboratory test and exploratory laparatomy were used for diagnostic purpose. The resolution of each case has been completed with a histopatlogic study of the anatomic segment involved. The resolution in the case number one was for pelvic flexure enterotomy to decompress the colon torsion. The case number two was threatened with large colon resection and sideto-side anastomosis of left dorsal and ventral colons. Both cases survived however the case two have better clinical progress post-surgical.

Irrigación arterial y venosa del útero y los ovarios de la perra (Canis familiaris) y su relación con la actividad ovárica / Arterial and venous supply of the uterus and ovaries in the bitch (Caninis familiaris) and its relationship with ovarian activity

Con el objetivo de describir las caracetrísticas anatómicas de la vascularización arterial y venosa del útero y los ovarios, el ciclo estral de nueve perras fue monitoreado utilizando citologías vaginales y ultrasonografía para inferir el mecanismo por el cual el útero ejerce su efecto sobre el ovario mediante técnicas radiográficas, clarificación de tejidos y maceración tisular. El estudio comprobó que en todas las fases del ciclo estral, el útero y los ovarios de la perra están irrigados principalmente por las arterias ovárica, uterina y vaginal, las cuales establecen anastomosis ipsilaterales entre ellas y contralaterales entre las arterias uterinas y vaginal. En el ligamento ancho, la vena uterina forma un circuito de dos ramas que se anastomosan craneal y caudalmente para permitir la conexión venosa entre el ovario y el cuerno ipsilateral al mismo. Pudo observarse a simple vista que en los especímenes provenientes de perras en fases de proestro y estro, el número de grosor de los vasos sanguíneos que irrigan el tracto reproductor es mayor en comparación con los especímenes provenientes de perras en fases de diestro y anestro. Estos estudios sugieren la necesidad de realizar investigaciones más avanzadas con el uso de hormonas marcadas para dilucidar el mecanismo de luteólisis en esta especie.

Leishmaniasis visceral en un canino / Visceral leishmaniasis in a dog

La leishmaniasis visceral es una enfermedad infecciosa y zoonótica distribuida mundialmente, que afecta al hombre, animales domésticos y silvestres. Su agente etiológico es un protozoario difásico del género Leishmania, cuyas especies difieren geográficamente en el Viejo y Nuevo Mundo, siendo transmitidos por vectores artrópodos de los géneros Phlebotomus y Lutzomyia en dichas áreas geográficas, respectivamente. En América Central y del Sur la Leishmania chagasi del complejo donovani, es causante de la leishmaniasis visceral, estando demostrada la positividad en el estado Aragua por estudios de seroprevalencia en la población canina autóctona. Un paciente canino macho, de raza Bóxer, de cuatro meses de edad se presentó con historia clínica de dificultad respiratoria e intolerancia al ejercicio de inicio agudo. Al examen físico se evidenció hipertermia y linfoadenomegalia generalizada; el ritmo y frecuencia cardiaca se encontraron alterados por disrritmias y taquicardia marcada; los sonidos cardiacos se apreciaron disminuidos de intensidad con matidez a la percusión torácica. La evolución fue desfavorable a pesar del tratamiento farmacológico, conllevando a la muerte del paciente en 48 horas de hospitalización con monitoreo contínuo. La necropsia reveló alteraciones macroscópicas de congestión pasiva crónica representados por hepato-esplenomegalia asociados a insuficiencia cardiaca congestiva bilateral (efusión pleuro-peritoneal y edema pulmonar). Histopatológicamente, se observó la presencia de amastigotes de Leishmania spp., en miocardio, bazo y nódulos linfáticos, soportando el diagnóstico etiológico de leishmaniasis visceral conjuntamente con la naturaleza infecciosa del cuadro clínico.

Comparación de olor, cuerpo, sabor y sensación posterior a la ingesta que producen cinco ampicilinas y dos trimetoprim-sulfametoxazol en presentaciones líquidas con sabor distinto / Comparison of the smell, body, taste and sensibility produced by five oral ampicillins and two trimetoprim-sulfametoxazol liquid formulations with different taste

Una de las características para el cumplimiento adecuado del tratamiento con un antibiótico líquido en la edad pediátrica es que el gusto y la sensación posterior a la ingestión sean acetables al paladar del niño. Se comparan siete suspensiones de antimicrobianos (cinco ampicilinas y dos trimetoprim-sulfametoxazol) de uso común en pediatría en un estudio doble ciego con 50 médicos pediatras voluntarios a determinar diferencias en la aceptabilidad del olor, textura, gusto, sensación posterior a la ingestión y el total de los antibióticos orales. en el recuento total el mejor es Pentrexyl, con diferencias significativas (p< 0.05), seguidos de omnipen, Binotal y pembritin sin diferencias significativas entre ellos, seguido de Lampicin y al final se encuentran Septrin y Bactrim. En el gusto el mejor fue Pentrexyl con diferenias significativa al resto. Muchos clínicos pueden considerar lo resultados del presente estudio, para seleccionar una suspensión antimicrobiana y así obtener un mejor cumplimiento del tratamiento

Infección en el paciente inmunocomprometido / Infection in the immunocompromised patient

Los pacientes con cáncer tienen mayor riesgo de presentar infección que la población general, sobre todo cuando la cuenta absoluta de neutrófilos es inferior a 500 células /µL. Comunmente la etiología de la infección es por microorganismos de la flora normal, aislándose con mayor frecuencia E. coli, Klebsiella pneumoniae, S. aureus, S. epidermidis y S. viridans; así como gérmenes oportunistas encontrándose implicados principalmente: Pneumocystis carinii, Candida sp, Aspergillus sp. y Cryptococcus neoformans. Puesto que en ocasiones la fiebre es la única manifestación presente en estos sujetos, es importante detectarlos oportunamente, por lo que debemos realizar un examen físico cuidadoso, poniendo especial atención a nivel hematológico, pulmonar, tejidos blandos y superficies mucosas, ya que en el huésped neutropénico son los principales sitios de infección. Es fundamental el inicio temprano del tratamiento, existiendo actualmente múltiples esquemas para niños inmunocomprometidos, siendo los más utilizados la combinación ceftazidima-amikacina y la monoterapia con imipenem, a las que se agrega anfotericina B cuando la fiebre persiste por más de una semana